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简要描述:HaCaT 人永生化表皮细胞,原代细胞|细胞系|细胞株|菌种;细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和培养条件
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HaCaT 人永生化表皮细胞
细胞株名称:HaCaT 人永生化表皮细胞
种属:人
性别:
组织来源:皮肤
生长特性:贴壁生长
形态特征:上皮细胞样
*培养基:
DMEM(内含2mM L-glutamine)+15%胎牛血清
培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml*培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。
注意:传代后一半用天天德州的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造
成生长不好。
HaCaT
冻存液:95%*培养液,5%DMSO
储存:液氮储存
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